Научный журнал
Современные наукоемкие технологии
ISSN 1812-7320
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,916

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ ДЛЯ ОЦЕНКИ МЕМБРАННОГО ПОТЕНЦИАЛА КЛЕТОК РАЗЛИЧНЫХ ЭПИТЕЛИЕВ ЧЕЛОВЕКА

Павлович Е.Р. Абрамова Т.В. Шишкин А.В. Колебцев А.А. Сухенко Е.П.
Одной из важнейших систем организма человека, определяющих целостность его функционирования является покровный эпителий, включающий эпидермис кожи и многослойный плоский неороговевающий эпителий. К настоящему времени морфология кожи человека хорошо изучена методами световой и электронной микроскопии. Однако остаются сложности с получением биопсийного материала от пациентов неинвазивными методами, особенно у детей и старых людей, как в норме, так и при патологии. Гораздо легче осуществлять отбор многослойных неороговевающих эпителиев (из ротовой полости или влагалища, с роговицы глаза), что может быть использовано в гастроэнтерологии, глазных болезнях, а также акушерстве и гинекологии для оценки общего состояния клеток в эпителиальном пласте. Оценивали электрофоретическую подвижность клеток буккального эпителия, а также частично ороговевающего эпителия спинки языка у 9 пациентов обоего пола в возрасте от 12 до 54 лет с помощью прибора «Цито-Эксперт», изготовленного в опытной партии на заводе «Кристалл» (г. Ижевск). Проводили соскоб эпителия шпателем с боковой поверхности щеки, или дорзальной поверхности языка и помещали его в капле дистиллята в камеру выдвижной платформы электрофоретической ячейки прибора. Взятие материала было технически не сложным и практически безболезненным. Накрывали каплю с образцом ткани покровным стеклом и рассматривали под световым микроскопом фирмы Карл Цейс при суммарном увеличении от 200 до 600 раз. Подсветка осуществлялась с помощью светодиода, а в камере поддерживалась комнатная температура. Устанавливалось значение тока между электродами камеры прибора «Цито-Эксперт» в 1500 мкА при частоте 0,5 Гц (регулятор напряжения устанавливали на делении «8»). Покровное стекло располагали симметрично относительно неизолированных графитовых электродов, которые смачивались жидкостью в камере. В качестве тестовых клеток до начала работы с эпителиальными клетками использовали высушенные клетки водоросли Spirulina platensis фирмы "Vita Max" (Франция) 5 мг сухих клеток на 1 мл воды. Определяли амплитуду колебаний слабо изогнутых клеток длиной 7,5 - 12,5 мкм. Для оценки амплитуды колебаний использовали окулярную линейку, цену деления которой определяли в зависимости от увеличений объективов и окуляров. При подаче напряжения на электроды камеры электрофоретической ячейки наблюдали колебательные движения буккальных эпителиальных клеток или полипообразные перемещения клеток эпителиального пласта языка в токопеременном поле, за счет наличия дзета-потенциала у живых клеток. Мертвые клетки в токопеременном поле не двигались. Движение одиночных клеток буккального эпителия или клеток эпителиального пласта языка продолжалось в камере в течение 45-60 минут с постепенным уменьшением амплитуды и количества клеток, участвовавших в движении. Добавление в камеру с одного из углов покровного стекла фиксаторов (спирт, формалин), красителей (толуидиновый или метиленовый синий) или лекарств (растворы йода или бриллиантовой зелени), убивало близлежащие клетки, и они переставали двигаться в токопеременном поле. При этом клетки наиболее удаленные от введенных веществ сохраняли движения, хотя и уменьшали его амплитуду. Красители наглядно выявляли ядра, особенно в буккальном эпителии, которые имели различную форму и размеры, что позволяло использовать соскобы для последующей полимеразной цепной реакции. Попытки использовать кожный эпителий встретили значительные трудности, так как приходилось удалять мертвые роговые чешуи механическим или химическим путем, с последующей диссоциацией клеточного пласта (в области шиповатого слоя) пепсином, при этом выход живых ядросодержащих клеток, двигающихся в токопеременном поле был не выше 20%. Обсуждается значение обнаруженной электрофоретической подвижности клеток разных типов эпителиев в оценке их состояния в норме и патологии у людей разного возраста.

Библиографическая ссылка

Павлович Е.Р., Абрамова Т.В., Шишкин А.В., Колебцев А.А., Сухенко Е.П. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ ДЛЯ ОЦЕНКИ МЕМБРАННОГО ПОТЕНЦИАЛА КЛЕТОК РАЗЛИЧНЫХ ЭПИТЕЛИЕВ ЧЕЛОВЕКА // Современные наукоемкие технологии. – 2007. – № 4. – С. 81-82;
URL: http://www.top-technologies.ru/ru/article/view?id=24878 (дата обращения: 26.05.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074