Проанализированы результаты ПЦР-анализа в промоторе гена NO-синтазы на наличие Т-786С полиморфизма и ассоциация его с типом гемодинамической реакции на нагрузку у 168 юношей. В группе лиц с гипертонической реакцией на нагрузку частота встречаемости генотипа СС составила 23,5%, в то время как у лиц с нормотонической реакцией – только у 6,8%. Частоты генотипов ТТ составили 32,4% и 50,5 % соответственно. Гетерозиготный генотип СТ встречался у 44,1% лиц с гипертонической реакцией и у 42,7% лиц с нормотонической реакцией. Таким образом было выявлено, что генотип СС статистически значимо (р<0.05) чаще встречается у лиц с гипертонической реакцией на нагрузку. Для лиц с данным генотипом характерен более высокий тонус периферических сосудов.

Работа поддержана грантом РФФИ, проект № 14-04-98823

В современных физиологических исследованиях наряду с классическими методами широко применяются различные варианты молекулярно-генетических исследований, что расширяет возможности анализа полученных данных и способствует более полному пониманию взаимосвязи между структурой и функцией различных систем [4]..

В последнее время проводятся многочисленные генетические исследования генов-кандидатов, кодирующих функцию основных физиологических систем, участвующих в регуляции основных параметров системы кровообращения, в том числе и в регуляции сосудистого тонуса. Важная роль в регуляции периферического сосудистого тонуса принадлежит оксиду азота (NO). Экспериментальными и клиническими исследованиями показано что дефицит продукции NO приводит к периферической вазоконстрикции [1,6].

Различная активность выработки NO связана с полиморфизмом гена NO-синтазы, в первую очередь, в зоне промотора гена. К настоящему моменту в этом гене выявлен полиморфизм в 11 местах, 8 их которых изучали в качестве фактора риска развития сердечно-сосудистой патологии. Однако анализ связей этих полиморфизмов как с базальным уровнем оксида азота, так и с повышенным риском сердечно - сосудистой патологии показал противоречивые результаты [7,9].

Цель работы заключалась в выявлении связи полиморфизма Т-786С промотора гена NO-синтазы с риском периферической вазоконстрикции у практически здоровых лиц в возрасте 18-22 лет, постоянно проживающие на территории Европейского Севера. Всего обследовано 168 мужчин. Критериями исключения являлись: наличие у обследуемых острых воспалительных заболеваний, хронических заболеваний внутренних органов, в том числе и в стадии стойкой ремиссии, ожирения.

Материалы и методы

У всех обследуемых было проведено молекулярно-генетическое исследование, на которое было получено информируемое согласие. ДНК выделяли из клеток венозной крови при помощи набора «ДНК-экспресс кровь» («Литех»). Детекцию полиморфизма Т-786С в гене NOS3 определялись методом полимеразной цепной реакции на базе генетической лаборатории ЦНИЛ СГМУ с использованием реактивов фирмы «Литех» (Москва). Оценку концентрации оксида азота в сыворотке крови по суммарной концентрации стабильных метаболитов нитратов/нитритов проводили биохимическим методом с использованием набора «Total NO/Nitrite/Nitrate («R&D Systems», США)». Тонус сосудов оценивался по данным периферической реовазографии с использованием индекса периферического сопротивления сосудов (ИПС). Параметры гемодинамики определялись до и после пробы с дозированной физической нагрузкой по Мартине-Кушелевскому [5] с выделением типов реакции сердечно-сосудистой системы. Все результаты обследования обработаны вариационно-статистическими методами с использованием программы SPSS 17.0. Нормальность распределения количественных признаков проверялась с использованием критериев Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05.

Результаты

Изучение среди обследованных лиц распределения генотипов по изучаемому полиморфизму гена NOS3 выявило следующее соотношение нормальных гомозигот (ТТ), гетерозигот (ТС) и патологических гомозигот (СС) – 42.6%, 46.1% и 11.3% соответственно. Таким образом, наиболее редким генотипом является генотип СС, который по данным ряда авторов ассоциирован с риском развития ИБС, артериальной гипертензии и коронароспазмом [3,8]. Наблюдаемое распределение частоты выявляемости генотипов соответствовало закону равновесия Харди-Вайнберга.

Все обследуемые были разделены на группы в зависимости от типа реакции на нагрузку. Гипертоническая реакция на нагрузку была выявлена у 23 % обследуемых, нормотоническая у – 73 %. Гипотоническая и дистоническая встречалась у 4 % [2].

В группе лиц с гипертонической реакцией на нагрузку частота встречаемости генотипа СС составила 23,5%, в то время как у лиц с нормотонической реакцией – только у 6,8%. Частоты генотипов ТТ составили 32,4% и 50,5 % соответственно. Гетерозиготный генотип СТ встречался у 44,1% лиц с гипертонической реакцией и у 42,7% лиц с нормотонической реакцией. Таким образом было выявлено, что генотип СС статистически значимо чаще (р<0.05) встречается у лиц с гипертонической реакцией на нагрузку.

Для лиц с генотипом СС характерна более выраженная периферическая вазоконстрикция, о которой говорят высокие значения индекса периферического сопротивления после нагрузки (р<0.05) по сравнению с другими генотипами . При анализе тонуса периферических сосудов у лиц с нормотонической реакцией статистических значимых различий в зависимости от генотипа выявлено не было (табл.1), а у лиц с гипертонической реакцией наличие генотипа СС сопровождается более высоким ИПС в покое (р<0.05), что может повышать риск развития у них в дальнейшем сосудистых нарушений. У лиц с гипертонической реакцией СДД увеличивалось на 23%, и составило 119,3 мм рт. ст. после нагрузки, в то время как у лиц с нормотонической наблюдался рост только на 9,7% до величины 106 мм рт. ст. Достоверных различий показателей СДД у лиц с разными генотипами выявлено не было.